原代細胞的培養是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養。因此，較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養，此時的細胞保持原有細胞的基本性質，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數。但實際上，通常把一代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養，是細胞培養中很重要的，其質量決定著傳代細胞的質量，因此它的培養的質量至關重要。
原代細胞是非常敏感的細胞，需要傳統培養基之外的額外營養物質。為了優化存活和生長，需要針對每種細胞類型選擇特定的培養基。例如，內皮細胞對營養的需求與上皮細胞或神經元有很大區別，因此需要特制的內皮細胞培養基。而傳統的細胞培養基依靠血清提供生長因子、激素、脂質和其他的未知組分，以支持細胞的生長。但對于原代細胞，高血清水平可導致細胞分化，或促進污染細胞如成纖維細胞的生長。
此外，添加血清也受到成本上升及不同批次間差異性的困擾。配制具有很少或沒有血清的特殊培養基則可以避免這些問題，并且更加有利于促進特定類型細胞的生長。此外，其他一些實踐，例如在更多的生理學相關底物上接種原代細胞而不是使用合成聚合物，可以顯著的促進細胞貼壁、增殖及保持純度。
實驗步驟：
1.試劑耗材準備；
2.取新鮮動物組織；
3.酶消化；
4.過濾網篩選、分離細胞；
5.加培養液，37℃、5%CO2培養；
6.傳代；
7.凍存；
8.復蘇。
應用：
1.為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段；
2.為傳代培養創造條件；
3.服務于臨床實踐，用于藥物篩選等。
